（原代）HBVP人腦血管周細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：（原代）HBVP人腦血管周細(xì)胞

品牌：上海研尊生物
貨期：現(xiàn)貨
細(xì)胞數(shù)：1x10^6 cells
細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞傳代：1:4~1:6傳代；每周換液2~3次
生長條件 ：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5% ; 溫度：37℃
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件：DMEM(高糖) +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2
傳代方法：建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件：無血清細(xì)胞凍存液
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞凍存：液氮凍存

細(xì)胞培養(yǎng)操作
干冰運輸：收到細(xì)胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇
常溫運輸：收到細(xì)胞后，請立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代
細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)80% - 90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟
 對于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細(xì)胞的脫落。
1.收到細(xì)胞后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因為運輸過程中存在顛簸，且有些細(xì)胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況，這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。
2.對于貼壁細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基，至剩余5-8mL 左右，隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，擰松瓶蓋。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶，請立即傳代。
3.對于懸浮的細(xì)胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管，150 g 離心 5 分鐘，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存管細(xì)胞操作步驟
注意： 為保證細(xì)胞的高活率，請收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約1分鐘。
2.一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完培養(yǎng)基的離心管中，150 g 離心 5 分鐘，用真空泵去除上清。
4.用完培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
5.將細(xì)胞置于含有合適CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)
1.吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基，加入PBS潤洗一次。
2.加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液，并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。
3.加入2mL完培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落，并使細(xì)胞分散。
4.將細(xì)胞懸液收集到15mL離心管里，150 g 離心 5 分鐘，用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
懸浮細(xì)胞傳代可參考以下方法：
一、直接傳代法
1.待懸浮細(xì)胞長滿至 80%～90%（細(xì)胞懸液變黃），即可傳代；
2.用吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2~1 / 3；
3.加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。
 二、離心傳代法（在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下）
1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)；
2.150 g 離心 5 min，棄去上層清液；
3.使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4.吸管吸取適量細(xì)胞懸液，裝入新的培養(yǎng)瓶，再加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存操作
1.1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1 x 106/mL，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識；
將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80°C冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存

本公司相關(guān)細(xì)胞請咨詢
BT-474/HR（人乳腺癌細(xì)胞曲妥珠單抗赫塞汀耐藥）
LAD2（人肥大細(xì)胞）
HEC1B(子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系)
人口腔粘膜上皮細(xì)胞
L2大鼠肺泡上皮細(xì)胞
IEC-6(大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞)
U251細(xì)胞 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
LN-229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞(STR鑒定正確)
CG4大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
TR146人食管磷癌細(xì)胞
C28/I2(人正常軟骨細(xì)胞)
H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)
LHCN-M2人源骨骼肌成肌細(xì)胞
HMC-1人肥大細(xì)胞株
RSC96大鼠雪旺細(xì)胞（種屬鑒定正確）
小鼠肺泡上皮細(xì)胞（MLE-12）
BEAS-2B細(xì)胞 人支氣管上皮細(xì)胞
人牙齦成纖維細(xì)胞； HGF-1
人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3細(xì)胞
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞
小鼠胚胎干細(xì)胞
人真皮成纖維細(xì)胞
SCL-1；人皮膚鱗癌細(xì)胞【已通過STR鑒定】
Caki-2_人腎細(xì)胞癌細(xì)胞
Tramp-C1(小鼠前列腺癌上皮細(xì)胞)
sNF02.2細(xì)胞 (ATCC編號:ys3821)人1型神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞  
CAL-120_人乳腺癌細(xì)胞
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CT26
HEL 299_正常胎兒肺纖維細(xì)胞
SW1463(人直腸腺癌細(xì)胞)
DU4475_人乳腺癌細(xì)胞
ARH-77_人白血病細(xì)胞
ECC10_人胃癌細(xì)胞
HMCB_人黑素瘤細(xì)胞
HPAF-II_人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞
HT29/219_人結(jié)腸癌細(xì)胞
HuH-1_人肝癌細(xì)胞
J82_人膀胱癌細(xì)胞
K-562_人白血病細(xì)胞
Caki-1_人腎細(xì)胞癌細(xì)胞
3T3-L1_小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
AU565_人乳腺癌細(xì)胞
BDCM_人白血病細(xì)胞
BEL7404_人肝癌細(xì)胞
BFTC-905_人膀胱癌細(xì)胞
BT-549_人乳腺癌細(xì)胞
BxPC-3_人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞
COLO 201_人結(jié)腸癌細(xì)胞
CCK-81_人結(jié)腸癌細(xì)胞
CT26.WT_小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
Daoy_人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞
HCC1187_人乳腺癌細(xì)胞
HEC-1-A_人子宮癌細(xì)胞
HT115_人結(jié)腸癌細(xì)胞
HuH-7_人肝癌細(xì)胞
KMS-21BM_人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)
KMS-26_人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
KNS-42_人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞
LU99_人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
M059J_人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞
MDA-MB-157_人乳腺癌細(xì)胞
MOLM-16_人白血病細(xì)胞
RPMI 8226_人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
SCH_人胃癌細(xì)胞
SNU-1041_人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
SNU-1750_人胃癌細(xì)胞
SNU-407_人結(jié)腸癌細(xì)胞
SUIT-2_人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞
SW837_人直腸癌細(xì)胞
TE-9_人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞